麥冬多效唑酶聯免疫ELISE快速檢測試劑盒

• ARS-ELS新鮮麥冬多效唑酶聯免疫ELISE快速檢測試劑盒   產品詳情：

深圳市艾瑞斯儀器有限公司是一家為用戶提供實驗室儀器一站式解決方案的企業。聚集了一批具有高水平研究人員和應用技術人才，不斷研制、開發大批新穎、優質、完善的儀器儀表產品，擁有完善的管理制度和強大的技術力量，為客戶提供售前，售中，售后的服務。公司與各大廠商建立了良好的合作關系，致力于為客戶提供優質的儀器和完善的服務，并提供有競爭力的價格。我們視質量為生命，視服務為己任，您的滿意，就是我們的追求。深圳市艾瑞斯儀器有限公司立足于現代科技理論與生產實踐相結合的基礎上，注重人才質量，講究集約開發，以服務于生產

• 使用說明書

  【測定原理】

  本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預包被偶聯抗原，樣本中的殘留物多效唑將和微孔條上預包被的偶聯抗原競爭抗多效唑抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物多效唑的含量成負相關，與標準曲線比較即可得出相應殘留物多效唑的含量。

  【試劑盒技術指標】

  規 格:96孔/盒

  靈 敏 度:100ppb

  檢測時間: 45min

  樣本檢測下限:

  生鮮蔬菜茶葉水果………………………3ppb

  樣本回收率:

  生鮮蔬菜茶葉水果……………………85%±10%

  交叉反應率:

  多效唑……………………………………

  【試劑盒組成】

  微量測試孔:1×96孔板（12條×8孔）

  標準溶液×6瓶:（1ml/瓶） 0ppb、0.2ppb、0.6ppb、 1.8ppb、5.4ppb、16.2ppb

  酶標記物 7ml………………………紅色帽

  抗體工作液 7ml ………………………綠色帽

  底物A液 7ml ………………………棕色帽

  底物B液 7ml …………………… 黑色帽

  終 止 液 7ml …………………… 黃色帽

  10×濃縮洗滌液40 ml ……………… 白色帽

  10×濃縮提取液50ml ·………………藍色帽

  【所用儀器、試劑】

  具備的儀器:酶標儀、均質器、振蕩器、離心機、剪刀 、天平

  微量移液器:單道 20μl～200μl、100μl～1000μl、多道 30～300 μl

  試劑與耗材:離心管（10ml）、一次性移液器吸頭，去離子水

  u 樣本前處理需配制:

  配液1、1×提取液配制

  將50ml的10×濃縮提取液與去離子水按照 1:9稀釋（1份濃縮提取液+9份去離子水），或按所需用量配制。

  配液2、洗液配制

  將40ml的10×濃縮洗滌液與去離子水按照1:9稀釋（1份濃縮洗滌液+9份去離子水），或按所需用量配制洗滌液

  【樣本前處理步驟】

  u 樣本處理前須知

  （a）實驗中必須使用一次性吸頭，吸取不同試劑時要更換吸頭。

  （b）實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈，必要時可對實驗器具進行清潔，以避免污染干擾實驗結果。

  u 樣本處理:

  （a）低檢測限動物組織樣本的處理方法（樣本稀釋倍數:5）

  取1±0.05g勻漿樣本與4mL的1×提取液混合3分鐘，

  取50µL用于分析。

  （B）高檢測限動物組織處理方法(樣本稀釋倍數:0.5倍)

  1、 用均質器均質樣本；稱取3±0.05g樣本于50ml離心管中，加入1g化鈉，再加入6ml乙腈，用振蕩器振蕩5分鐘；4000轉/分以上,室溫離心10分鐘；

  2、 取上清液2ml至干凈玻璃試管中，于65℃水浴下氮氣/空氣吹干；

  加入0.5ml正己烷溶解干燥的殘留物，再加0.5ml配好的提取液強烈振蕩混合30s，室溫4000r/min以上離心5min。

  取50 µl下層相用于分析。

  【新鮮麥冬多效唑酶聯免疫ELISE快速檢測試劑盒酶標免疫分析程序】

  操作步驟:

  從4℃冷藏環境中取出所需試劑，置室溫（20-25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

  取出需要數量的微孔及框架，將不用的微孔放入自封袋，保存于2-8℃。

  編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

  加標準品/樣本50µl /孔，然后加酶標記物50μl/孔，再加入抗體工作液50µl/孔。輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板，25℃環境避光反應30分鐘。

  取出將孔內液體甩干，用洗液250µl/孔洗板4-5次，每次間隔15-30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的頭刺破）。

  顯色:每孔加入底物A液50μl，再加底物B液50μl，輕輕振蕩混勻，25℃環境中避光顯色15min。

  測定:每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測，在5min內讀完數據），測定每孔OD值。

  【結果判定】

  結果判定有兩種方法，粗略判定可用第1種方法，定量判定用第2種方法。注意樣本吸光值與其所含多效唑的含量成負相關。

  1、粗略判定:

  用樣本的平均吸光度值與標準值比較即可得出其濃度范圍(ng /ml)。假設樣本1的吸光度值為0.221，樣本2的吸光度值為0.795，標準液吸光度值分別是:0ppb為1.82；0.2ppb為1.52；0.6ppb為1.114；1.8ppb為0.660；5.4ppb為0.318；16.2ppb為0.145。則樣本1的濃度范圍是5.4ppb-16.2ppb；樣本2的濃度范圍是0.6ppb-1.8ppb。乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中多效唑實際濃度。

  2、定量分析:

  所獲得的每個濃度標準溶液和樣本吸光度值的平均值（B）除以個標準（0標準）的吸光度值（B0）再乘以，即百分吸光度值。

  
  

  百分吸光度值（%）＝	B	×
  	B0

  B標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值

  B00ng/ml標準溶液的平均吸光度值

  以標準品百分吸光率為縱坐標，以多效唑標準品濃度（ng/ml）的半對數為橫坐標，繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中，從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度，乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中多效唑實際濃度。

  若利用試劑盒專業分析軟件進行計算，更便于大量樣品的準確、快速分析。

  3、標準準曲線:

  B/B0 (%)

  0.2 0.6 1.8 5.4 16.2

  (ppb)[µg/kg]

  多效唑(ppb)[µg/kg]

  圖1:多效唑檢測試劑盒的回歸曲線

  4、再現性:

  %CV

  0 0.2 0.6 1.8 5.4 16.2

  多效唑(ppb)[µg/kg]

  圖2:多效唑檢測試劑盒的精密度

  由多個不同的實驗結果確定了精密度，圖2顯示出多效唑檢測試劑盒的精密度情況，獲得的標準吸收值的變異系數（%CV）對相應多效唑濃度作曲線，可以看到在全部范圍內變異系數如此之低，可以得到很好的再現性。

  【注意事項】

  使用前將所有試劑溫度回升至室溫20-25℃。試劑及標本沒有回到室溫（20-25℃）會導致所有標準的OD值偏低。

  在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況，則會伴隨著出現標準曲線不成線性，重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。

  混合要均勻，否則會出現重復性不好的現象。

  反應終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。

  不要使用過了有效日期的試劑盒，稀釋或攙雜使用會引起靈敏度、OD值的變化。不要交換使用不同批號的盒中試劑。

  不用的微孔板放進自封袋密封；標準物質和無色的發色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

  顯色液若有任何顏色表明變質，應當棄之。0標準的吸光度值小于0.5個單位（A450nm< 0.5 ）時，表示試劑可能變質。

  該試劑盒反應溫度為25℃，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。

  【儲存】原包裝應儲存于2～8℃保鮮冷藏，切勿冷凍。

  【有效期】有效期12個月;生產日期、有效期、批號見外包裝。

  
  

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