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在做科研實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn),很多Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)因?yàn)樘锥霈F(xiàn)倒置現(xiàn)象。其實(shí)跳孔的定義是酶標(biāo)板從左側(cè)到右側(cè)的孔或從上到下的孔內(nèi)信號(hào)出現(xiàn)顯著的倒置現(xiàn)象,以下根據(jù)售后指導(dǎo)列出幾個(gè)客戶(hù)常見(jiàn)問(wèn)題給予解答。如您有類(lèi)似情況發(fā)生,歡迎參考閱讀。更多Elisa試劑盒技術(shù)詳情請(qǐng)來(lái)咨詢(xún)。
我剛配置試劑的時(shí)候中斷了,這是否會(huì)影響我的實(shí)驗(yàn)結(jié)果?
這可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生波動(dòng)的曲線(xiàn)。在移液之確定所有的標(biāo)準(zhǔn)品或者樣品是否配制完好。請(qǐng)?jiān)谠噭┡渲仆甑?5-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi)。(除非特別說(shuō)明)
是否需要一個(gè)多道移液器?
在配制諸如底物,酶結(jié)合物,或者稀釋液的時(shí)候,hao選擇連續(xù)或多道移液器。
如果我沒(méi)有平衡試劑會(huì)怎樣?
沒(méi)有平衡的試劑會(huì)導(dǎo)致孔之間溫度不均,使整個(gè)酶標(biāo)板的信號(hào)產(chǎn)生變異。除非特別說(shuō)明,試劑一般在使用之都要平衡至室溫。
每次檢測(cè)都會(huì)有推薦的孵育時(shí)間和溫度。冷凍的試劑一般需要更長(zhǎng)的孵育時(shí)間。所以hao使用說(shuō)明書(shū)上推薦的孵育溫度和時(shí)間。
是否需要蓋板?
參看試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)。如果說(shuō)明書(shū)內(nèi)的實(shí)驗(yàn)步驟中有推薦使用蓋板,則在使用時(shí)應(yīng)選用與酶標(biāo)板配套的蓋板,使邊緣與酶標(biāo)板緊密契合。如果蓋板的一邊突起,則會(huì)產(chǎn)生信號(hào)的差別。
酶標(biāo)儀的設(shè)置怎樣影響我的結(jié)果?
對(duì)于底物測(cè)定,如果讀數(shù)時(shí)間等于或超過(guò)2/孔,使從孔到一孔在讀書(shū)時(shí)存在時(shí)間上的延誤,會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的異變。在底物反應(yīng)階段,辣根過(guò)氧化物酶會(huì)一直作用直到底物反應(yīng)全。而由于時(shí)間的延誤,底物越來(lái)越少,底物反應(yīng)也受到影響。將酶標(biāo)儀的讀數(shù)時(shí)間設(shè)定為1.0/孔。
是否可以根據(jù)自己的方案來(lái)調(diào)整孵育時(shí)間?
更改孵育時(shí)間或溫度會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)不能達(dá)到平衡或過(guò)度反應(yīng)。請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)推薦的孵育時(shí)間和溫度操作。
如果同時(shí)進(jìn)行多項(xiàng)檢測(cè),對(duì)每孔必需分別計(jì)時(shí)已避免孵育不足或過(guò)度孵育。
注:以上資料僅供參考!
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