一、實驗步驟
預冷準備:實驗開始前,先啟動冷水機,開啟預冷程序,確保設備進入穩(wěn)定預冷狀態(tài),為后續(xù)均質(zhì)過程提供適宜的溫度環(huán)境。
設備啟動:待冷水機溫度達到預設標準后,依次打開實驗電源總開關(guān)及壓力表開關(guān),檢查壓力表是否正常顯示,確保設備供電及壓力監(jiān)測系統(tǒng)無誤。
純水預處理:向設備料斗中加入適量純水,啟動主機運行。觀察液流狀態(tài),持續(xù)運行至料斗及管道內(nèi)空氣排盡,液流呈現(xiàn)連續(xù)、穩(wěn)定的狀態(tài),無氣泡產(chǎn)生。
樣品均質(zhì)破碎:當進料口處的純水即將進入設備內(nèi)部時,迅速將預處理好的樣品菌絲體勻速倒入料斗內(nèi)。操作壓力調(diào)節(jié)旋鈕,緩慢將系統(tǒng)壓力提升至 120MPa,保持該壓力對樣品進行循環(huán)均質(zhì)破碎處理,確保菌絲體充分破碎。
樣品收集:待均質(zhì)處理達到預設效果后,緩慢開啟泄壓閥進行泄壓操作,待壓力降至常壓后,將破碎后的樣品接入預先清潔干燥的容器中密封保存。
設備清洗與封存:樣品收集完成后,向料斗中再次加入適量純水,以低壓模式運行設備,對進料管道、均質(zhì)腔等關(guān)鍵部件進行初步清洗;清洗完成后,排出純水,加入適量乙醇,繼續(xù)以低壓模式運行設備進行深度清洗,清洗結(jié)束后,保留設備內(nèi)部分乙醇,關(guān)閉電源,完成設備封存。
二、實驗結(jié)果與分析
實驗結(jié)束后,通過顯微鏡觀察破碎后的樣品狀態(tài),結(jié)果顯示:菌絲體已破碎,與均質(zhì)前的完整細胞及菌絲結(jié)構(gòu)相比,視野內(nèi)無明顯完整細胞和菌絲形態(tài),破碎產(chǎn)物呈均勻分散狀態(tài)。該結(jié)果表明,在 120MPa 壓力下的循環(huán)均質(zhì)處理能夠有效破壞菌絲體的細胞壁結(jié)構(gòu),使細胞內(nèi)的多糖等目標成分充分暴露,為后續(xù)的多糖提取實驗提供了良好的前提條件,顯著提升提取效率和提取純度。


三、注意事項
物料與管道清潔:實驗前需清洗進料管道,去除殘留雜質(zhì);待均質(zhì)的料液需經(jīng)過過濾處理,確保不含固體顆粒等雜質(zhì),避免堵塞管道或損壞均質(zhì)腔。
連接部位檢查:啟動設備前,仔細檢查各管道接口、壓力塊上的固定螺栓是否鎖緊,防止高壓運行時出現(xiàn)漏液或部件松動現(xiàn)象。
防空氣進入:在加入純水、樣品及清洗液的過程中,需保持操作勻速緩慢,避免產(chǎn)生氣泡;運行過程中若發(fā)現(xiàn)液流中有氣泡,應及時停機排空氣,防止空氣進入泵體導致設備故障或均質(zhì)效果下降。
乙醇封存要求:設備清洗完成后,必須保留一部分乙醇在設備內(nèi)部,形成密封環(huán)境,防止部件生銹腐蝕,延長設備使用壽命。
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