冷原子吸收法檢測硫柳汞含量

【摘要】：目的：應用冷原子吸收法檢測硫柳汞含量。方法：將硫柳汞消化還原成汞蒸汽,經測汞儀檢測。結果　用該方法制備標準曲線具有很好的相關性,相關系數r （n=10） 為019997±0.0002。樣品重復檢測10次,平均變異系數為1.03 % ,回收率為96.0%。與雙硫腙滴定法檢測結果進行比較,差異無顯著意義。結論：此法可作為硫柳汞含量檢測的常規方法。
【關鍵詞】：冷原子吸收法;硫柳汞;流感病毒裂解疫苗
生物制品中常規硫柳汞檢測方法是雙硫腙滴定法。本實驗以冷原子吸收法（測汞儀）對流感病毒裂解（流感）疫苗中的硫柳汞含量進行檢測,獲得了比較滿意的結果,現報告如下。
材料與方法
1. 材料
1.1 　標準汞溶液:精密稱取干燥至恒重的氯化高汞（分析純）0.1354g,于100ml容量瓶,加純化水至刻度,即為1.0mg/ml標準汞儲備液。取1.0 ml儲備液稀釋100 倍,即為10μg/ml標準汞溶液。臨用前,取10μg/ml標準汞溶液1.0ml,稀釋至100ml,即為0.1μg/ml標準汞溶液。
1.2 　30%氯化亞錫:取氯化亞錫30g ,加至25ml濃鹽酸中,加溫使其*溶解后,用純化水稀釋至100ml。
1.3 　待檢樣品:上海生物制品研究所生產的流感疫苗。
1.4 　回收試驗樣品:取干燥至恒重的硫柳汞,
溶于未加硫柳汞的流感疫苗原液中。
1.5 　冷原子吸收法測汞儀:上海華光儀器儀表廠產品。
2. 方法
2.1 　樣品處理:取硫柳汞含量為50μg 的樣品1ml,置具塞消化管中,加濃硫酸2ml,1∶1 硝酸0.5ml,搖勻,置沸水浴消化2h至溶液澄清,冷卻后,稀釋至250ml。
2.2 　冷原子吸收法測定: 取處理好的樣品0.5ml,置翻泡還原瓶中,加5ml純化水,30%氯化亞錫還原劑2ml,立即用測汞儀測定。
2.3 　標準曲線繪制:精密吸取0.1μgPml 標準汞溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml ,置翻泡還原瓶中,其余操作同樣品,計算公式為:樣品硫柳汞含量%（g/ml）=測得樣品硫柳汞μg 數×樣品稀釋倍數×2.017（汞換算至硫柳汞的常數）×0.000001×100%所用純化水均不應含汞。
結　　果
1. 標準曲線及重復性
按照上述方法繪制標準曲線,各點重復檢測10次,結果平均相關系數r 為0.9997±0.0002。
2. 回收實驗
取未加硫柳汞的流感疫苗,定量加入硫柳汞,按樣品檢測方法消化、定容,用測汞儀檢測硫柳汞含量,計算其回收率。
3. 精密性實驗
取3批樣品同時重復檢測10次,平均CV值分別為1.02%、1.00%和1.46%,表明實驗內重復性較好。取上述3批樣品在不同時間重復檢測3次,平均CV 值分別為0.995 %、1.77 %和2.05%,表明重復性好。
4. 可靠性試驗
取批號為200310001 的流感疫苗,消化后室溫放置,在0、2、4、8、24 h 分別檢測其硫柳汞含量,結果差異無顯著意義（t=0.2,P>0.05）。
5 兩種方法檢測樣品的結果比較
用冷原子吸收法和雙硫腙滴定法同時檢測10批流感疫苗,兩種方法檢測結果的差異無顯著意義（P>0.05）。
討　　論
用冷原子吸收法檢測硫柳汞含量,具有操作簡便、快速的優點。該方法繪制的標準曲線具有很好的相關性,用該法一次檢測3批樣品10次,平均變異系數1.03% ,表現了很好的重復性和穩定性。平均回收率為96.0%,與雙硫腙滴定法檢測結果比較差異無顯著意義。雙硫腙滴定法是化學萃取法,手工操作較為繁瑣,人為影響因素較多。比較而言,冷原子吸收法檢測硫柳汞無毒害,而且準確可靠,建議能在生物制品行業中推廣,作為硫柳汞含量檢測的常規方法。
參　考　文　獻
[1] 中國生物制品規程,2000.678～679.
[2] 雷殿良. 檢定方法的驗證.國外生物制品管理和標準（續Ⅲ）.2000.67～75.
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